七彩小球不过处理总结
1、光路不稳定:运行小球时,图形不好,显微镜看流动室,光斑偏向圆孔边缘,调整好后运行一段时间光斑又偏离一些。——处理:光路的不稳定往往是液路不稳定造成的,(1)先灌注和排气泡,把过滤器里的空气都排一遍。(2)运行液流启动。(3)钢丝通样本针,然后用cleaning当样本高速运行5分钟,然后用水当样本高速运行5分钟。
2、光路调整:液路稳定后再调光路。通过调整光纤出来的螺丝,调光线的上下,让光斑在孔中间,调光线的前后,让光斑最强。光斑的左右通过调聚焦桶后面的左右螺丝。
3、调整过光线的上下后,需要运行CST的基线来校准通过不同激光的时间差。然后再运行CHENK看看结果好不好。
4、运行七彩小球不过(1)运行七彩小球和运行CST不是同一个软件。两个软件不能同时和仪器通信,要一个Standby后另一个才能点Connect。
(2)七彩小球有校准补偿电压等的功能,如果调整过光路,运行七彩小球失败可以点完成后再运行一次。(3)光路调整后,运行CST并不会对运行七彩小球起到校准作用,如果调整后运行七彩小球时检测不到细胞数,可以移除七彩小球的电压补偿的文件,让其重新生成。
5、运行七彩小球步骤:(1)先将运行小球的软件Standby,然后再去运行七彩小球的软件里点Connect。(2)七彩小球的配比,将试管拆开后,加入配套液体到刻度线处,然后避光反应15分钟,再拿出来混匀后才可以运行。
(3)Cytometer-Setup-Standard Setup...-核对批号-Next-勾选Run setup in Manual mode-安装试管-Next-等待完成。
6、标本正常与否:运行标本时,收集到2000个淋巴细胞就结束,正常收集的总细胞数再2万左右。今天结束收集时,已收集200-300万个细胞数,图形下方有大片黑色区域。最后七彩小球通过后,标本结果就正常了。